1988-2688
RCCV Vol. 2 (2). 2008
DISTRIBUCIÓN DEL VIRUS DE LA LENGUA AZUL EN TEJIDOS DE OVEJAS
INFECTADAS DE MANERA NATURAL
BLUETONGUE VIRUS DISTRIBUTION IN TISSUES FROM NATURALLY
INFECTED SHEEP
L. Espinosa Montalbán
Departamento de Sanidad Animal, Facultad de Veterinaria, Universidad Complutense de
Madrid
Resumen
La lengua azul está causada por un virus ARN bicatenario del género Orbivirus. Afecta
a óvidos, bóvidos y otros rumiantes y está transmitida por mosquitos del género Culicoides.
Da lugar a grandes pérdidas económicas. Existe una notable diferencia entre los 24 serotipos
distintos existentes del virus. El objetivo de este trabajo ha sido estudiar la distribución del
serotipo 1 del virus de la lengua azul mediante la reacción en cadena de la polimerasa con
retrotranscriptasa (RT-PCR) en distintos tejidos de ovejas infectadas de manera natural en
Andalucía, donde circulan los serotipos 1 y 4. A partir de muestras de distintos tejidos de
dichas ovejas, se extrajo el ARN y se realizaron dos ensayos de RT-PCR, uno genérico y
otro específico del serotipo 1. Sólo las muestras de sangre de una de las ovejas resultó
positiva a ambas técnicas y, al secuenciar el fragmento se correspondió con el serotipo 1. Esto
demuestra que la sangres es una buena muestra de elección para la detección de este serotipo.
Se están realizando nuevos estudios para determinar con seguridad la eficacia de estas
técnicas de RT-PCR.
Palabras clave: lengua azul, RT-PCR, serotipo.
Summary
Bluetongue is caused by an RNA-virus belonging to the Orbivirus genus. It affects
sheep, cattle and other ruminants and is transmitted by midges from the Culicoides genus. It
causes important economical losses. There is a notorious difference between the 24 different
BTV serotypes. The objective of this study is to analyze the distribution of the Bluetongue
virus in different tissues by Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) for
BTV serotype 1 in naturally infected sheep from Andalucía, where serotypes 1 and 4 are
present. RNA was extracted from different tissues sample of these sheep and after that, a
generic and serotype 1-especific RT-PCR was carried out. Only the blood sample from one of
these sheep was positive and the sequence of the fragment proved that it belonged to BTV
60
ISSN: 1988-2688
RCCV Vol. 2 (2). 2008
serotype 1. This demostrates that blood is a good sample for the detection of serotype 1.
Further assays will be developed in order to determinate the efficacy of this RT-PCR.
Key words: Bluetongue, RT-PCR, serotype.
Introducción
La lengua azul (LA) es una enfermedad causada por un virus ARN bicatenario sin
envuelta y de simetría icosaédrica perteneciente el género Orbivirus. Este virus afecta a
óvidos, bóvidos y otros rumiantes como pueden ser los cérvidos y se transmite por insectos
del género Culicoides. Algunos de los síntomas que produce son edema, coronitis que da
lugar a cojera, úlceras en mucosas y encías y cianosis de la lengua, lo que le da el nombre
debido a la tonalidad azulada de la misma. Es una enfermedad que da lugar a grandes pérdidas
económicas.
Se conocen 24 serotipos de LA, cuya distribución ha aumentado en los último diez años
hasta superar el paralelo 40º N (límite norte de la distribución de la enfermedad hasta 2006),
llegando en la actualidad a afectar países europeos que se encuentran a latitud 60º N. Los
serotipos 1, 2, 4 y 8 han producido pérdidas económicas en España desde el año 2000. En el
resto de Europa circulan, además, los serotipos 8, 9 y 16.
Las secuencias génicas que codifican proteínas víricas, tanto estructurales como no
estructurales, se utilizan como diana para detectar la presencia del virus. Entre ellas, cabe
destacar las proteínas VP2 y NS1. La primera forma parte de la capa externa del virus y
presenta gran variabilidad entre los serotipos, por lo que se usa para una detección
seroespecífica. La segunda es no estructural y su secuencia genética está muy conservada en
distintos serotipos, por lo que sirve para la detección genérica del virus.
El objetivo de este trabajo ha sido estudiar la distribución del virus en distintos tejidos
de ovejas infectadas de manera natural, utilizando la técnica de reacción en cadena de la
polimerasa con retrotranscriptasa (RT-PCR) para poder detectar el
RCCV Vol. 2 (2). 2008
DISTRIBUCIÓN DEL VIRUS DE LA LENGUA AZUL EN TEJIDOS DE OVEJAS
INFECTADAS DE MANERA NATURAL
BLUETONGUE VIRUS DISTRIBUTION IN TISSUES FROM NATURALLY
INFECTED SHEEP
L. Espinosa Montalbán
Departamento de Sanidad Animal, Facultad de Veterinaria, Universidad Complutense de
Madrid
Resumen
La lengua azul está causada por un virus ARN bicatenario del género Orbivirus. Afecta
a óvidos, bóvidos y otros rumiantes y está transmitida por mosquitos del género Culicoides.
Da lugar a grandes pérdidas económicas. Existe una notable diferencia entre los 24 serotipos
distintos existentes del virus. El objetivo de este trabajo ha sido estudiar la distribución del
serotipo 1 del virus de la lengua azul mediante la reacción en cadena de la polimerasa con
retrotranscriptasa (RT-PCR) en distintos tejidos de ovejas infectadas de manera natural en
Andalucía, donde circulan los serotipos 1 y 4. A partir de muestras de distintos tejidos de
dichas ovejas, se extrajo el ARN y se realizaron dos ensayos de RT-PCR, uno genérico y
otro específico del serotipo 1. Sólo las muestras de sangre de una de las ovejas resultó
positiva a ambas técnicas y, al secuenciar el fragmento se correspondió con el serotipo 1. Esto
demuestra que la sangres es una buena muestra de elección para la detección de este serotipo.
Se están realizando nuevos estudios para determinar con seguridad la eficacia de estas
técnicas de RT-PCR.
Palabras clave: lengua azul, RT-PCR, serotipo.
Summary
Bluetongue is caused by an RNA-virus belonging to the Orbivirus genus. It affects
sheep, cattle and other ruminants and is transmitted by midges from the Culicoides genus. It
causes important economical losses. There is a notorious difference between the 24 different
BTV serotypes. The objective of this study is to analyze the distribution of the Bluetongue
virus in different tissues by Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) for
BTV serotype 1 in naturally infected sheep from Andalucía, where serotypes 1 and 4 are
present. RNA was extracted from different tissues sample of these sheep and after that, a
generic and serotype 1-especific RT-PCR was carried out. Only the blood sample from one of
these sheep was positive and the sequence of the fragment proved that it belonged to BTV
60
ISSN: 1988-2688
RCCV Vol. 2 (2). 2008
serotype 1. This demostrates that blood is a good sample for the detection of serotype 1.
Further assays will be developed in order to determinate the efficacy of this RT-PCR.
Key words: Bluetongue, RT-PCR, serotype.
Introducción
La lengua azul (LA) es una enfermedad causada por un virus ARN bicatenario sin
envuelta y de simetría icosaédrica perteneciente el género Orbivirus. Este virus afecta a
óvidos, bóvidos y otros rumiantes como pueden ser los cérvidos y se transmite por insectos
del género Culicoides. Algunos de los síntomas que produce son edema, coronitis que da
lugar a cojera, úlceras en mucosas y encías y cianosis de la lengua, lo que le da el nombre
debido a la tonalidad azulada de la misma. Es una enfermedad que da lugar a grandes pérdidas
económicas.
Se conocen 24 serotipos de LA, cuya distribución ha aumentado en los último diez años
hasta superar el paralelo 40º N (límite norte de la distribución de la enfermedad hasta 2006),
llegando en la actualidad a afectar países europeos que se encuentran a latitud 60º N. Los
serotipos 1, 2, 4 y 8 han producido pérdidas económicas en España desde el año 2000. En el
resto de Europa circulan, además, los serotipos 8, 9 y 16.
Las secuencias génicas que codifican proteínas víricas, tanto estructurales como no
estructurales, se utilizan como diana para detectar la presencia del virus. Entre ellas, cabe
destacar las proteínas VP2 y NS1. La primera forma parte de la capa externa del virus y
presenta gran variabilidad entre los serotipos, por lo que se usa para una detección
seroespecífica. La segunda es no estructural y su secuencia genética está muy conservada en
distintos serotipos, por lo que sirve para la detección genérica del virus.
El objetivo de este trabajo ha sido estudiar la distribución del virus en distintos tejidos
de ovejas infectadas de manera natural, utilizando la técnica de reacción en cadena de la
polimerasa con retrotranscriptasa (RT-PCR) para poder detectar el